Голощапов Олег Валерьевич* — кандидат медицинских наук, заведующий отделением реанимации и интенсивной терапии № 3, НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р.М. Горбачевой, ассистент кафедры анестезиологии и реаниматологии, Первый Санкт-Петербургский ГМУ им. академика И.П. Павлова.
197022, Санкт-Петербург, ул. Льва Толстого, 6–8
Oleg V. Goloshchapov — Cand. Sci. (Med.), Head of the Intensive Care Unit No. 3, R. Gorbacheva Memorial Research Institute of Pediatric Oncology, Hematology and Transplantation; Teaching Assistant at the Department of Anesthesiology and Intensive Care.
197022, Saint Petersburg, L’va Tolstogo str., 6–8
Бейнарович Анастасия Викторовна — врач-гематолог отделения трансплантации костного мозга для взрослых, НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р.М. Горбачевой.
197022, Санкт-Петербург, ул. Льва Толстого, 6–8
Anastasia V. Beynarovich — Clinical Hematologist, Department of Adult Bone Marrow Transplantation, R. Gorbacheva Memorial Research Institute of Pediatric Oncology, Hematology and Transplantation.
197022, Saint Petersburg, L’va Tolstogo str., 6–8
Чухловин Алексей Борисович — доктор медицинских наук, профессор, заведующий лабораторией трансплантологии, НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р.М. Горбачевой.
197022, Санкт-Петербург, ул. Льва Толстого, 6–8
Alexey B. Chukhlovin — Dr. Sci. (Med.), Professor, Head of the Transplantology Laboratory, R. Gorbacheva Memorial Research Institute of Pediatric Oncology, Hematology and Transplantation; Teaching Assistant at the Department of Anesthesiology and Intensive Care.
197022, Saint Petersburg, L’va Tolstogo str., 6–8
Клементьева Руслана Викторовна — врач анестезиолог-реаниматолог отделения реанимации и интенсивной терапии № 3, НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р.М. Горбачевой.
197022, Санкт-Петербург, ул. Льва Толстого, 6–8
Ruslana V. Klementeva — Anesthesiologist-Resuscitator of the Resuscitation and Intensive Care Unit No. 3, R. Gorbacheva Memorial Research Institute of Pediatric Oncology, Hematology and Transplantation.
197022, Saint Petersburg, L’va Tolstogo str., 6–8
Щербаков Александр Александрович — врач — анестезиолог-реаниматолог отделения реанимации и интенсивной терапии № 3, НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р.М. Горбачевой.
197022, Санкт-Петербург, ул. Льва Толстого, 6–8
Alexander A. Shcherbakov — Anesthesiologist-Resuscitator of the Resuscitation and Intensive Care Unit No. 3, R. Gorbacheva Memorial Research Institute of Pediatric Oncology, Hematology and Transplantation.
197022, Saint Petersburg, L’va Tolstogo str., 6–8
Бакин Евгений Александрович — кандидат технических наук, старший научный сотрудник отдела онкологии, гематологии и трансплантологии для подростков и взрослых.
197022, Санкт-Петербург, ул. Льва Толстого, 6–8
Evgeny A. Bakin — Cand. Sci. (Techn.), Senior Researcher, Department of Oncology, Hematology and Transplantology for Adolescents and Adults, R. Gorbacheva Memorial Research Institute of Pediatric Oncology, Hematology and Transplantation; Pavlov FSPSMU.
197022, Saint Petersburg, L’va Tolstogo str., 6–8
Голубовская Ирина Константиновна — кандидат медицинских наук, врач-гематолог поликлинического отделения с дневным стационаром для взрослых, НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р.М. Горбачевой.
197022, Санкт-Петербург, ул. Льва Толстого, 6–8
Irina K. Golubovskaya — Cand. Sci. (Med.), Hematologist of the Outpatient Department with Day Hospital for Adults, R. Gorbacheva Memorial Research Institute of Pediatric Oncology, Hematology and Transplantation.
197022, Saint Petersburg, L’va Tolstogo str., 6–8
Венцловайте Наталья Дмитриевна — младший научный сотрудник научно-исследовательского клинического отдела вирусных гепатитов и заболеваний печени у детей.
197022, Санкт-Петербург, ул. Профессора Попова, 9
Natalia D. Ventslovayte — Junior Researcher, Research Clinical Department of Viral Hepatitis and Liver Diseases in Children.
197022, Saint Petersburg, Professora Popova str., 9
Юдинцева Олеся Сергеевна — врач-гематолог, НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р.М. Горбачевой.
197022, Санкт-Петербург, ул. Льва Толстого, 6–8
Olesya S. Yudintseva — Clinical Hematologist, R. Gorbacheva Memorial Research Institute of Pediatric Oncology, Hematology and Transplantation.
197022, Saint Petersburg, L’va Tolstogo str., 6–8
Горчакова Маргарита Валерьевна — биолог лаборатории клинической иммунологии и молекулярной диагностики.
197022, Санкт-Петербург, ул. Льва Толстого, 6–8
Margarita V. Gorchakova — Biologist of the Laboratory of Clinical Immunology and Molecular Diagnostics.
197022, Saint Petersburg, L’va Tolstogo str., 6–8
Карев Вадим Евгеньевич — заведующий научно-исследовательским клиническим отделом тканевых и патоморфологических методов исследования.
197022, Санкт-Петербург, ул. Профессора Попова, 9
Vadim E. Karev — Head of the Research Clinical Department of Tissue and Pathomorphological Research Methods, Pediatric Research and Clinical Center for Infectious Diseases under the Federal Medical Biological Agency.
197022, Saint Petersburg, Professora Popova str., 9
Кучер Максим Анатольевич — доктор медицинских наук, руководитель отдела клинического питания, НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р.М. Горбачевой, доцент кафедры гематологии, трансфузиологии и трансплантологии с курсом детской онкологии факультета последипломного образования, ФГБОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский ГМУ им. академика И.П. Павлова» Министерства здравоохранения Российской Федерации.
197022, Санкт-Петербург, ул. Льва Толстого, 6–8
Maxim A. Kucher — Dr. Sci. (Med.), Head of Clinical Nutrition Department, R. Gorbacheva Memorial Research Institute of Pediatric Oncology, Hematology and Transplantation, Associate Professor of the Department of Hematology, Transfusiology and Transplantology with a course in Pediatric Oncology, Faculty of Postgraduate Education.
197022, Saint Petersburg, L’va Tolstogo str., 6–8
Суворова Мария Александровна — кандидат биологических наук, генеральный директор Научно-исследовательской лаборатории.
197022, Санкт-Петербург, Каменноостровский пр., 42б
Mariia A. Suvorova — Cand. Sci. (Biol.), Director General of the Explana Research Laboratory.
197022, Saint Petersburg, Kamennoostrovsky Ave, 42B
Светкина Екатерина Владимировна — врач клинической лабораторной диагностики отдела лабораторной диагностики, ФГБУ «Всероссийский центр экстренной и радиационной медицины им. А.М. Никифорова» Министерства Российской Федерации по делам гражданской обороны, чрезвычайным ситуациям и ликвидации последствий стихийных бедствий.
194044, Санкт-Петербург, ул. Академика Лебедева, 4/2
Ekaterina V. Svetkina — Clinical Laboratory Diagnostics Doctor of the Laboratory Diagnostics Department, А.М. Nikiforov Russian Center of Emergency and Radiation Medicine» of the Ministry of Russian Federation for Civil Defense, Emergencies and Elimination of Consequences of Natural Disasters.
194044, Saint Petersburg, Akademika Lebedeva str., 4/2
Родионов Геннадий Георгиевич — доктор медицинский наук, доцент, ведущий научный сотрудник, заведующий научно-исследовательской лабораторией токсикологии и лекарственного мониторинга научно-исследовательского отдела биоиндикации, «Всероссийский центр экстренной и радиационной медицины им. А.М. Никифорова» Министерства Российской Федерации по делам гражданской обороны, чрезвычайным ситуациям и ликвидации последствий стихийных бедствий.
194044, Санкт-Петербург, ул. Академика Лебедева, 4/2
Gennadij G. Rodionov — Dr. Sci. (Med.), Docent, Leading Researcher, Head of the Research Laboratory of Toxicology and Drug Monitoring of the Research Department of Bioindication, The Ministry of Russian Federation for Civil Defense.
194044, Saint Petersburg, Akademika Lebedeva str., 4/2
Гостев Владимир Валерьевич — кандидат биологических наук, старший научный сотрудник научно-исследовательского отдела медицинской микробиологии и молекулярной эпидемиологии, ФГБУ «Детский научно-клинический центр инфекционных болезней Федерального медико-биологического агентства»; доцент кафедры медицинской микробиологии, Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова.
197022, Санкт-Петербург, ул. Профессора Попова, 9
Vladimir V. Gostev — Cand. Sci. (Biol.), Senior Researcher, Research Department of Medical Microbiology and Molecular Epidemiology, Pediatric Research and Clinical Center for Infectious Diseases under the Federal Medical Biological Agency; Associate Professor at the Department of Medical Microbiology.
197022, Санкт-Петербург, ул. Профессора Попова, 9
Сидоренко Сергей Владимирович — доктор медицинских наук, профессор, заведующий научно-исследовательским отделом медицинской микробиологии и молекулярной эпидемиологии, ФГБУ «Детский научно-клинический центр инфекционных болезней Федерального медико-биологического агентства»; профессор кафедры медицинской микробиологии, Северо-Западный ГМУ им. И.И. Мечникова.
197022, Санкт-Петербург, ул. Профессора Попова, 9
Sergey V. Sidorenko — Dr. Sci. (Med.), Professor, Head of the Research Department of Medical Microbiology and Molecular Epidemiology, Pediatric Research and Clinical Center for Infectious Diseases under the Federal Medical Biological Agency; Professor of the Department of Medical Microbiology.
197022, Saint Petersburg, Professora Popova str., 9
Моисеев Иван Сергеевич — доктор медицинских наук, заместитель директора по науке НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р.М. Горбачевой.
197022, Санкт-Петербург, ул. Льва Толстого, 6–8
Ivan S. Moiseev — Dr. Sci. (Med.), Deputy Director for Research, R. Gorbacheva Memorial Research Institute of Pediatric Oncology, Hematology and Transplantation.
197022, Saint Petersburg, L’va Tolstogo str., 6–8
Кулагин Александр Дмитриевич — доктор медицинских наук, профессор, директор НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р.М. Горбачевой.
197022, Санкт-Петербург, ул. Льва Толстого, 6–8
Alexander D. Kulagin — Dr. Sci. (Med.), Professor, Director, R. Gorbacheva Memorial Research Institute of Pediatric Oncology, Hematology and Transplantation,.
197022, Saint Petersburg, L’va Tolstogo str., 6–8
Цель представления клинического наблюдения: продемонстрировать основные молекулярно-биологические, метаболические и иммунологические эффекты трансплантации фекальной микробиоты (ТФМ) на примере редкого случая развития острой реакции «трансплантат против хозяина» с поражением кишечника (РТПХ ЖКТ) у пациентки после проведения аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (алло-ТГСК).
Материалы и методы. Для оценки основных, известных механизмов ТФМ было использовано таргетное секвенирование фрагментов V3–V4 участка гена 16S рРНК на платформе Miseq (16s секвенирования), мультиплексная полимеразная цепная реакция в режиме реального времени, хромато-масс-спектрометрия, иммунофенотипирование субпопуляций лимфоцитов, гистологический и иммуногистохимический методы исследования.
Клинический случай. Пациентке 40 лет с диагнозом «миелодиспластический синдром», анамнезом двух неуспешных алло-ТГСК в связи с неприживлением трансплантата в качестве «терапии спасения» была выполнена третья гаплоидентичная ТГСК от отца. В связи с развитием в раннем посттрансплантационном периоде вирусно-бактериального колита (ассоциированного с полирезистентным штаммом K. pneumoniae и вирусом герпеса 6-го типа) на 46–47-е сутки после алло-ТГСК была выполнена ТФМ. После проведенной процедуры отмечалось полное разрешение симптомов энтеропатии. Однако на Д+106 после гаплоидентичной ТГСК в связи с детекцией минимальной остаточной болезни была отменена иммуносупрессивная терапия, что привело к развитию РТПХ по типу overlap-синдрома с поражением кожи 4-й степени, слизистых оболочек кишечника 3-й степени. Это потребовало возобновления и в последующем усиления иммуносупрессивной терапии, на фоне чего отмечалось полное разрешение симптомов РТПХ.
После выполнения ТФМ у пациентки отмечено полное разрешение клинических симптомов вирусно-бактериального колита. По результатам 16s секвенирования, значимо возросло видовое разнообразие фекальной микробиоты, выявлено уменьшение относительного количества условно-патогенных бактерий (род Klebsiella, Enterococcus, Streptococcus), уверенный рост комменсальных микроорганизмов: Bacteroides, появление родов Faecalibacterium, Blautia, Rozeburia. Развитие острой РТПХ ЖКТ, спровоцированной отменой такролимуса, способствовало повторному эпизоду обеднения микробиоты кишечника. По мере разрешения симптомов РТПХ на фоне возобновления иммуносупрессии был вновь зафиксирован рост индекса Шеннона, а состав фекальной микробиоты пациентки приблизился к таковому у донора. Состав микробиоты на всех клинических этапах — до и после ТФМ, в период максимальной манифестации симптомов острой РТПХ кишечника, усиления иммуносупрессивной терапии — оказывал влияние на метаболизм желчных, жирных кислот плазмы крови и на показатели иммунной системы.
Выводы. ТФМ может быть частью терапии, направленной на раннюю реконституцию иммунной системы и обмена органических кислот, у пациентов после алло-ТГСК. Состав фекальной микробиоты, метаболический профиль и спектр субпопуляции лимфоцитов могут быть маркерами контроля комплексной реабилитации после алло-ТГСК.
Aim: demonstration of basic molecular biological, metabolic and immunological effects of fecal microbiota transplantation (FMT), on the example of a rare case of acute graft-versus-host disease (GVHD) with intestinal damage in a patient after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (allo-HSCT).
Materials and methods. To monitor the basic effects of FMT, we performed targeted DNA sequencing of 16S rRNA gene (V3–V4) using MiSeq platform as well as multiplex real-time PCR, MS/gas chromatography technique, immunophenotyping of blood lymphocytes, histological and immunohistochemical techniques.
Clinical case. A 40-year-old female patient diagnosed with myelodysplastic syndrome, with a history of two unsuccessful allo-HSCTs due to graft failure, underwent the third haploidentical HSCT (haplo-HSCT) from her father as ‘salvage’ therapy. Due to early viral/bacterial colitis post-transplant associated with a multidrug-resistant strain of K. pneumoniae and herpes virus type 6, FMT was performed on days 46 and 47 after allo-HSCT. Complete resolution of the enteropathy symptoms was noted following FMT. However, immunosuppressive therapy was canceled on D+106 after haplo-HSCT due to the detection of minimal residual disease causing development of the ‘overlap’-type GVHD with damage skin lesions grade 4, and intestinal mucous membranes grade 3. This complication required resumption and subsequent intensification of immunosuppressive therapy with complete resolution of GVHD symptoms. Following FMT treatment, the patient showed complete resolution of clinical colitis symptoms. According to results of 16S rRNA sequencing, the species-specific diversity of fecal microbiota increased significantly, along with decreased relative contents of opportunistic bacteria (Klebsiella, Enterococcus, Streptococcus genera). A significant growth was revealed for commensal Bacteroidota, and re-emergence of Faecalibacterium, Blautia, Roseburia. Acute gastrointestinal GVHD promoted by tacrolimus withdrawal was associated with repeated depletion of intestinal microbiota. Upon resolution of GVHD and resumed immunosuppression, increased microbiota diversity (Shannon index) was again recorded, and the parameters of patient’s fecal microbiota reached the donor values. The microbiota shifts at all clinical stages (before and after FMT, at the peak of acute intestinal GVHD and intensive immunosuppressive therapy) showed some relations with metabolism of bile and fatty acids in blood plasma and immune parameters.
Conclusions. FMT may be a component of complex therapy aimed at early reconstitution of immune system and organic acid metabolism in patients after allo-HSCT. The composition of fecal microbiota, metabolic profile and spectrum of lymphocyte subpopulations may be markers for monitoring complex rehabilitation after allo-HSCT.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.