gastro-jРоссийский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологииRussian Journal of Gastroenterology, Hepatology, Coloproctology1382-43762658-6673«Gastro» LLCgastro-j-1639Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯORIGINAL ARTICLESСравнительная характеристика апоптоза периферических лейкоцитов при вирусных и аутоиммунных заболеваниях печениComparative characteristic of apoptosis of peripheral leukocytes at viral and autoimmune liver diseasesБуеверовА. O.BuyeverovA. O.КиселеваО. Ю.KiselyevaO. Yu.ИвашкинВ. Т.IvashkinV. T.БелушкинаН. Н.BelushkinaN. N.МоскалеваЕ. Ю.MoskalevaYe. Yu.ШироковаЕ. Н.ShirokovaYe. N.МаевскаяМ. В.MayevskayaM. V.2009050820091944147Copyright © Буеверов А.O., Киселева О.Ю., Ивашкин В.Т., Белушкина Н.Н., Москалева Е.Ю., Широкова Е.Н., Маевская М.В., 20092009Буеверов А.O., Киселева О.Ю., Ивашкин В.Т., Белушкина Н.Н., Москалева Е.Ю., Широкова Е.Н., Маевская М.В.Buyeverov A.O., Kiselyeva O.Y., Ivashkin V.T., Belushkina N.N., Moskaleva Y.Y., Shirokova Y.N., Mayevskaya M.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.gastro-j.ru/jour/article/view/1639

Цель исследования. Сравнить уровень апо­птоза периферических лейкоцитов при хронических гепатитах (ХГ) В, С и синдроме аутоиммунного перекреста (САП) аутоиммунного гепатита и первичного билиарного цирроза.Материал и методы. Для изучения уровня апо­птоза и структуры ДНК лейкоцитов периферической крови были обследованы 54 больных ХГ. У 12 человек диагностирован ХГВ, у 22 – ХГС, у 20 – САП. Контрольная группа состояла из 20 здоровых добровольцев без признаков патологии печени и с отрицательными результатами анализов крови на маркеры HBV­ и HCV­инфекции. У пациентов с ХГ и у здоровых лиц определялось количество лимфоцитов и гранулоцитов периферической крови в состоянии апоптоза непосредственно после выделения и после 24­-часовой инкубации в культуральной среде методом проточной цитофлуориметрии, у больных с САП – только спонтанный апоптоз общей лейкоцитарной фракции.Результаты. У больных ХГ апоптоз как лимфоцитов, так и гранулоцитов был достоверно выше по сравнению с контролем как непосредственно после выделения, так и после суточной инкубации. Число лейкоцитов периферической крови в состоянии спонтанного апоптоза у больных с САП также было достоверно выше в сравнении с показателями контрольной группы (9,9±0,8 и 4,2±0,1, p0,05).Выводы. Уровень апоптоза лейкоцитов периферической крови у обследованных больных достоверно превышает уровень апоптоза этих клеток у здоровых лиц. В периферической крови больных ХГ присутствуют не только лейкоциты в состоянии апоптоза, но и коммитированные к нему клетки, что проявляется усилением апоптоза мононуклеарных и полиморфно­ядерных лейкоцитов после 24­часовой инкубации в культуральной среде. Значимые различия между уровнем апоптоза лейкоцитов периферической крови у пациентов с ХГВ, ХГС и САП отсутствуют, что указывает на роль апоптоза в качестве унифицированного механизма повреждения клеток.

Aim of investigation

Aim of investigation. To compare a level of apoptosis of peripheral blood leukocytes at chronic hepatites (CH) B, C and autoimmune overlap syndrome (AOS) of autoimmune hepatitis and primary biliary cirrhosis.

Material and methods

Material and methods. To study level of apoptosis and pattern of DNA of peripheral blood leukocytes 54 patients with CH have been investigated. In 12 person CHB was diagnosed, in 22 – CHC, in 20 – AOS. The control group consisted of 20 healthy volunteers without symptoms of liver disease and with negative markers of HBV-and HCV-infections. In patients with CH and healthy persons quantity of lymphocytes and granulocytes of peripheral blood in apoptosis state immediately after extraction and after 24-hour incubation in culture medium by cytoflowmetry method, in patients with AOS – only spontaneous apoptosis of total leukocytic fraction was determined.

Results

Results. At CH patients apoptosis of both lymphocytes and granulocytes was significantly higher in comparison to control immediately after extraction, as well as after 24-hour incubation. The number of leukocytes of peripheral blood in a state of spontaneous apoptosis in patients with AOS was also significantly higher in comparison to scores of control group (9,9±0,8 and 4,2±0,1, p< 0,05). Comparison of average levels of spontaneous apoptosis of total fraction of leukocytes showed absence of significant differences between CHB and AOS and CHC and AOS groups (p> 0,05).

Conclusions

Conclusions. The level of apoptosis of peripheral blood leukocytes at investigated patients significantly exceeds the level of apoptosis of these cells at healthy persons. In peripheral blood of patients with CH there are not only leukocytes at a state of apoptosis, but also apoptosis-committed cells, that is manifested by mononuclear and polymorphonuclear leukocytes apoptosis enhancement after 24-hour incubation in culture medium. Significant differences between a level of apoptosis of leukocytes of peripheral blood in patients with CHB, CHC and AOS were absent, that indicates a role of apoptosis as the unified mechanism of cell damage.

хронический гепатит Вхронический гепатит Ссиндром аутоиммунного перекресталейкоциты периферической кровиапоптозchronic hepatitis Bchronic hepatitis Cautoimmune overlap syndromeleukocytes of a peripheral bloodapoptosisReferencesАнтонова Т.В., Николаенко С.Н., Барановская В.Б. Роль прооксидантной и антиоксидантной систем в патогенезе вирусного гепатита В // Рос. журн. гастроэнтерол. гепатол. колопроктол. – 1995. – Т. 5, № 3 (прил. 1). – С. 8.Антонова Т.В., Николаенко С.Н., Барановская В.Б. Роль прооксидантной и антиоксидантной систем в патогенезе вирусного гепатита В // Рос. журн. гастроэнтерол. гепатол. колопроктол. – 1995. – Т. 5, № 3 (прил. 1). – С. 8.Аруин Л.И. Апоптоз и патология печени // Рос. журн. гастроэнтерол. гепатол. колопроктол. – 1998. – Т. 8, № 2. – С. 6–10.Аруин Л.И. Апоптоз и патология печени // Рос. журн. гастроэнтерол. гепатол. колопроктол. – 1998. – Т. 8, № 2. – С. 6–10.Буеверов А.О. Аутоиммунный гепатит // Рациональная фармакотерапия в гастроэнтерологии / Под ред. В.Т. Ивашкина, А.О. Буеверова. – М.: Изд-во «Литтерра», 2009. – С. 168–174.Буеверов А.О. Аутоиммунный гепатит // Рациональная фармакотерапия в гастроэнтерологии / Под ред. В.Т. Ивашкина, А.О. Буеверова. – М.: Изд-во «Литтерра», 2009. – С. 168–174.Буеверов А.О., Тихонина Е.В., Москалева Е.Ю. и др. Апоптоз периферических лейкоцитов при хронических вирусных гепатитах // Рос. журн. гастроэнтерол. гепатол. колопроктол. – 2000. – Т. 10, № 6. – С. 30–33.Буеверов А.О., Тихонина Е.В., Москалева Е.Ю. и др. Апоптоз периферических лейкоцитов при хронических вирусных гепатитах // Рос. журн. гастроэнтерол. гепатол. колопроктол. – 2000. – Т. 10, № 6. – С. 30–33.Дмитриева Е.В., Москалева Е.Ю., Буеверов А.О. и др. Роль системы Fas/Fas-лиганд в индукции апоптоза гепатоцитов при хронических вирусных гепатитах // Арх. патол. – 2003. – Т. 65, № 6. – С. 13–16.Дмитриева Е.В., Москалева Е.Ю., Буеверов А.О. и др. Роль системы Fas/Fas-лиганд в индукции апоптоза гепатоцитов при хронических вирусных гепатитах // Арх. патол. – 2003. – Т. 65, № 6. – С. 13–16.Ando K., Hiroishi K., Kaneko T. et al. Perforin, Fas/Fas ligand, and TNF-alpha pathways as specific and bystander killing mechanisms of hepatitis C virus-specific human CTL // J. Immunol. – 1997. – Vol. 158. – P. 5283–5291.Ando K., Hiroishi K., Kaneko T. et al. Perforin, Fas/Fas ligand, and TNF-alpha pathways as specific and bystander killing mechanisms of hepatitis C virus-specific human CTL // J. Immunol. – 1997. – Vol. 158. – P. 5283–5291.Ashkenazi A., Dixit V.M. Death receptors: signaling and modulation // Science. – 1998. – Vol. 281. – P. 1305–1308.Ashkenazi A., Dixit V.M. Death receptors: signaling and modulation // Science. – 1998. – Vol. 281. – P. 1305–1308.Ellis R.E., Yuan J.Y., Horvitz H.R. Mechanisms and functions of cell death // Ann. Rev. Cell Biol. – 1991. – Vol. 7. – P. 663–698.Ellis R.E., Yuan J.Y., Horvitz H.R. Mechanisms and functions of cell death // Ann. Rev. Cell Biol. – 1991. – Vol. 7. – P. 663–698.Hatano E. Tumor necrosis factor signaling in hepatocyte apoptosis // J. Gastroenterol. Hepatol. // 2007. – Vol. 22 (suppl. 1). – P. 43–44.Hatano E. Tumor necrosis factor signaling in hepatocyte apoptosis // J. Gastroenterol. Hepatol. // 2007. – Vol. 22 (suppl. 1). – P. 43–44.Herzer K., Sprinzl M.F., Galle P.R. Hepatitis viruses: live and let die // Liver Int. – 2007. – Vol. 27. – P. 293–301.Herzer K., Sprinzl M.F., Galle P.R. Hepatitis viruses: live and let die // Liver Int. – 2007. – Vol. 27. – P. 293–301.Kremer A.E., Rust C., Eichhorn P. et al. Immune-mediated liver diseases: programmed cell death ligands and circulating apoptotic markers // Expert Rev. Mol. Diagn. – 2009. – Vol. 9. – P. 139–156.Kremer A.E., Rust C., Eichhorn P. et al. Immune-mediated liver diseases: programmed cell death ligands and circulating apoptotic markers // Expert Rev. Mol. Diagn. – 2009. – Vol. 9. – P. 139–156.Liles W., Kiener P., Ledbetter J. Differential expression of Fas (CD95) and Fas ligand on normal human phagocytes: implications for the regulation of apoptosis in neutrophils // J. Exp. Med. – 1996. – Vol. 184. – P. 429–440.Liles W., Kiener P., Ledbetter J. Differential expression of Fas (CD95) and Fas ligand on normal human phagocytes: implications for the regulation of apoptosis in neutrophils // J. Exp. Med. – 1996. – Vol. 184. – P. 429–440.Mackay I.R., Leskovsek N.V., Rose N.R. Cell damage and autoimmunity: a critical appraisal // J. Autoimmun. – 2008. – Vol. 30. – P. 5–11.Mackay I.R., Leskovsek N.V., Rose N.R. Cell damage and autoimmunity: a critical appraisal // J. Autoimmun. – 2008. – Vol. 30. – P. 5–11.Saitou Y., Shiraki K., Fuke H. et al. Involvement of tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand and tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand receptors in viral hepatic diseases // Hum. Pathol. – 2005. – Vol. 36. – P. 1066–1073.Saitou Y., Shiraki K., Fuke H. et al. Involvement of tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand and tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand receptors in viral hepatic diseases // Hum. Pathol. – 2005. – Vol. 36. – P. 1066–1073.Sprinzl M.F., Rosset S., Male F.-F. et al. Chronic viral infections causes an apoptosis resistant hepatocellular phenotype by induction of regeneration factors of the liver // Hepatology. – 2005. – Vol. 42, N 4 (suppl. 1). – P. 503.Sprinzl M.F., Rosset S., Male F.-F. et al. Chronic viral infections causes an apoptosis resistant hepatocellular phenotype by induction of regeneration factors of the liver // Hepatology. – 2005. – Vol. 42, N 4 (suppl. 1). – P. 503.Tsikrikoni A., Kyriakou D.S., Rigopoulou E.I. et al. Markers of cell activation and apoptosis in bone marrow mononuclear cells of patients with autoimmune hepatitis type 1 and primary biliary cirrhosis // J. Hepatol. – 2005. – Vol. 42. – P. 393–399.Tsikrikoni A., Kyriakou D.S., Rigopoulou E.I. et al. Markers of cell activation and apoptosis in bone marrow mononuclear cells of patients with autoimmune hepatitis type 1 and primary biliary cirrhosis // J. Hepatol. – 2005. – Vol. 42. – P. 393–399.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.